進(jìn)口elisa檢測(cè)試劑盒所采用的方法及基本原理介紹
點(diǎn)擊次數(shù)：756 更新時(shí)間：2020-12-18
進(jìn)口elisa檢測(cè)試劑盒是一種常用的固相酶免疫測(cè)定方法，由于ELISA方法靈敏，特異性強(qiáng)不需要特殊設(shè)備，所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在臨床檢驗(yàn)中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常可見到一些錯(cuò)誤結(jié)果(即假陽(yáng)性或假陰性)。
溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測(cè)易產(chǎn)生假陽(yáng)性。可能是溶血血清中含有過(guò)氧化酶物質(zhì)(紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素)，在洗滌過(guò)程中往往難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧，從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍(lán)色，產(chǎn)生假陽(yáng)性，所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。
在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、造成假陽(yáng)性;為克服上述干擾，ELISA試劑盒測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測(cè)定，5d內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存。凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混合后再測(cè)定，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔，不可強(qiáng)烈振蕩。
進(jìn)口elisa檢測(cè)試劑盒的基本原理有三條：
1、抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶聯(lián)接形成酶聯(lián)絡(luò)物，其而此種酶聯(lián)絡(luò)物仍能堅(jiān)持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性。
2、抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分彼此吸附，并堅(jiān)持其免疫學(xué)活性。
3、酶聯(lián)絡(luò)物與相應(yīng)抗原或抗體聯(lián)絡(luò)后，可依據(jù)參與底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是不是有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯現(xiàn)試驗(yàn)效果。
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